terça-feira, 12 de outubro de 2021

A descoberta do código genético

O código genético permite a todas as células de todos os seres vivos transformarem a informação de nucleótidos, contida no DNA, em proteínas.

Os 20 aminoácidos ((a.a.) constituintes das proteínas) têm de corresponder a nucleótidos. Deste modo, são possíveis 64 combinações de 3 nucleótidos pata determinar os 20 a.a..

Em 1961 os investigadores Niremberg e Matthaei publicaram um estudo que relacionava uma sequência de mRNA com a estrutura primária das proteínas, dando início à descoberta do código genético.

Estes dois cientistas conseguiram produzir 'in vitro' uma sequência polipeptídica a partir de um RNAm sintético.

Eles adicionaram uma cadeia de RNAm poli-U a um extrato celular que continha todas as moléculas necessárias à síntese de proteínas (ribossomas, RNAt's, enzimas (aminoacil RNAT sintetase), ATP e a.a.s) e produziram uma cadeia contendo apenas fenilalanina.

Deste modo o 1º CODÃO (sequência de 3 nucleótidos de RNAm) a ser descoberto foi o UUU, que correspondia ao a.a. FENILALANINA.


Em 1964 Niremberg e Leder fizeram uma experiência que permitiu a descoberta da correspondência entre todos os codões e os respetivos aminoácidos.

Eles descobriram que se adicionassem 1 CODÃO (3 nucleótidos de RNAm) a uma mistura contendo RIBOSSOMAS e RNAt ligado ao respetivo a.a., poderiam decifrar o código.

Se o CODÃO, fosse reconhecido pelo RNAt, então forma-se-ía um agregado molecular de RIBOSSOMA+CODÃO+Complexo RNAt+a.a..

Niremberg e Leder conseguiram separar este complexo molecular usando um filtro de nitrocelulose e marcando radioativamente os a.a..


No esquema podemos ver de forma simples a experiência de Niremberg e Leder.

Filtração da mistura e resultados. (ser = serina)


a) Filtrou-se o codão UUC + Ribossomas + Complexo SER-RNAt

b) Filtrou-se o codão UCU + Ribossomas + Complexo SER-RNAt

c) Filtrou-se o codão CUU + Ribossomas + Complexo SER-RNAt

d) Filtrou-se Ribossomas + Complexo SER-RNAt


Discussão 

1) Identifica, justificando qual o  controlo desta experiência.

1.1.) Para certificar a fiabilidade dos resultados, refere outro dispositivo controlo que poderia ser montado.

2) Identifica:

2.1.) variáveis independentes;

2.2.) variáveis dependentes.

3) Explica o resultado experimental de Niremberg e Leder evidenciado no esquema anterior.








Proposta de correção

1) O esquema D poderá ser considerado o controlo da experiência, uma vez que apenas são adicionados ribossomas e o complexo SER-RNAt. Portanto, o complexo a.a.-RNAt, sem o CODÃO não se liga ao ribossoma.

1.1.) Poder-se-iam juntar os 3 tipos de codões (UUC, UCU e CUU) e verificar se os resultados eram idênticos ao esquema b.

2.1.) Por exemplo: Os diversos tipos de CODÕES testados;

2.2.) Por exemplo: Os diversos complexos que ficaram no filtro.

3. Testando os diversos tipos de codões com um determinado a.a. associado ao RNAt e fornecendo ribossomas (local onde ocorre a tradução), estes cientistas conseguiram descobrir passo a passo a que a.a.s  correspondiam os 64 codões. 

Na representação esquemática, descobriram que o codão UCU codifica o a.a. serina.

A utilização do filtro revelou-se importante, pois consegue reter o complexo molecular formado pelo ribossoma, o codão e o RNAt ligado ao a.a..

Ao marcar os a.a.s com radioatividade podemos facilmente constatar a presença destes no filtro ou no filtrado, percebendo se houve ou não formação do complexo molecular característico da tradução.


Fonte: Adaptado de https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/3005455/mod_resource/content/1/BiologiaMolecular_texto06final.pdf em 11/10/2021